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PCR產(chǎn)物純化方法(酚/氯仿):1.取PCR產(chǎn)物(此次為200ul),加入50ul酚,加入50ul氯仿/異戊醇(分相上層應該是澄清的,如果不是澄清,可以再次離心5min,將澄清上清取出);2.劇烈振蕩(100bp的小片斷沒有必要劇烈振蕩),混勻后,離心6000-8000轉(zhuǎn)(一般大片斷離心10000rpm),5min。(只能離心5min,過久的話就會酚變成沉淀);3.取上請,不要吸到中間箱,吸取后再在棄液中加入雙蒸水,再次離心,收集上清,反復兩次;4.上請2倍體積的100%乙醇...
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實時熒光定量PCR(qPCR)是生命科學領域的革命性技術,能在PCR擴增過程中實時監(jiān)測熒光信號,實現(xiàn)對靶基因的精確定量。熒光定量PCR已成為分子生物學領域的金標準技術,但其特異性優(yōu)化仍是許多研究者面臨的挑戰(zhàn)。然而,PCR特異性問題始終困擾著許多研究人員。非特異性擴增不僅會導致實驗結(jié)果不準確,還會浪費寶貴的樣本和時間。本文將詳細介紹提高PCR特異性的九大方法,并結(jié)合最新市場數(shù)據(jù),幫助您選擇適合的熒光定量PCR儀器和試劑。一、引物設計:特異性擴增的基石細心地進行引物設計是PCR中...
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一、操作規(guī)范類FAQQ1:添加PfuDNA聚合酶后,為何不能像加Taq酶那樣輕彈管底,只能直接離心?A1:核心原因是PfuDNA聚合酶具有3'-5'外切酶活性,該活性對引物存在潛在降解風險。輕彈管底會加速酶與體系中的引物、模板接觸,可能導致引物提前降解,影響后續(xù)PCR擴增效率;而直接離心可在實現(xiàn)試劑輕微混勻的同時,減少酶與引物的非特異性相互作用,避免引物降解。Q2:使用PfuDNA聚合酶時,為何需延長退火時間、預延伸時間及延伸時間?A2:因PfuDNA聚合酶的延伸活性顯著低于...
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今天我們要聊一個在實驗室里特別常見,卻又讓人有點頭疼的問題——液氮罐里的液氮,為什么總是消耗得飛快?尤其是在蘇州這種夏天悶熱潮濕的地方,這個問題就更明顯了。每個月花在補液氮上的錢,是不是總覺得有點心疼?別急,今天我就來幫你支支招,咱們一起把這份成本給降下來。咱們得先建立一個共識:液氮罐里的液氮會變少,這是正常的物理現(xiàn)象,沒辦法全避免。為什么呢?因為我們的液氮罐,就像一個超級保溫杯,里面是零下196攝氏度的極低溫世界,而外面是我們所處的室溫環(huán)境。再好的隔熱技術,也沒法做到100...
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一、產(chǎn)品概述海爾DW-86L830BPT超低溫冰箱,作為一款超低溫設備,專為生物領域精心打造??蓪Ω黝惿飿颖尽⒄滟F藥品、高敏試劑等進行長期、可靠的超低溫保存,確保其質(zhì)量與活性不受影響。該冰箱運用前沿制冷科技,能營造穩(wěn)定的-86℃低溫環(huán)境,是生物存儲的理想選擇。二、產(chǎn)品特點(一)精準控溫1.搭載高靈敏度溫度傳感器,配合先進智能控溫算法,可將箱內(nèi)溫度精準維持在-86℃,溫度波動被嚴格控制在極小范圍,為存儲物品提供恒定低溫環(huán)境。2.實時監(jiān)測箱內(nèi)溫度變化,并通過高清顯示屏直觀呈現(xiàn),...
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